细胞周期检测方法及原理—源井生物_风闻

细胞周期Cell Cycle

细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为间期与分裂期两个阶段。间期（interphase）分为三个阶段：DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）与DNA合成后期（G2期） M期（mitosis）即细胞分裂期，分为：前期，中期，后期和末期。细胞周期的调节主要是通过G1期的阻留而实现的，G0期即指细胞处于阻留的状态。细胞通过M期一分为二，有的可继续分裂进行周期循环，有的转入G0期。G0期是脱离细胞周期暂时停止分裂的一个阶段。但在一定的刺激下，又可进入细胞周期，合成DNA并进行分裂。G0期的特点为：①未受刺激的G0细胞，DNA合成与细胞分裂的潜力仍然存在; ②当G0细胞受到刺激而增殖时，又能合成DNA并进行细胞分裂。细胞周期的调节主要是通过G1期的阻留而实现的，G0期即指细胞处于阻留的状态。细胞通过M期一分为二，有的可继续分裂进行周期循环，有的转入G0期。G0期是脱离细胞周期暂时停止分裂的一个阶段。但在一定的刺激下，又可进入细胞周期，合成DNA并进行分裂。

技术原理PI染色-流式细胞术检测细胞周期的原理：碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种可以嵌合到双链DNA和RNA的碱基对中并与之结合的荧光染料，无碱基特异性。PI与双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被PI染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情况，可以进行细胞周期的分析。由于细胞周期各时相的DNA 含量不同,通常正常细胞的G1/ G0期具有二倍体细胞的DNA含量(2N) ,而G2/ M期具有四倍体细胞的DNA 含量(4N) ,而S期的DNA 含量介于二倍体和四倍体之间。PI可以与DNA结合，其荧光强度直接反映细胞内DNA的含量。因此,通过流式细胞仪结合PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为G1/G0期、S期和G2/M 期,获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。结果示例参考文献： A. https://ibook.antpedia.com/z/93690.html B,C. Xie, Kewei et al. “Yes-associated protein regulates podocyte cell cycle re-entry and dedifferentiation in adriamycin-induced nephropathy.” Cell death & disease vol. 10,12 915. 4 Dec. 2019, doi:10.1038/s41419-019-2139-3​